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#1. 細胞繼代培養
細胞繼代 培養 · 吸出細胞培養液,放入離心管中,離心1000 rpm、 5分鐘。 · 吸除上清液,加入適量之新鮮培養基,與沉澱細胞(cell pellet)混和均勻後,依稀釋比例轉移至新的 ...
#2. 細胞之繼代培養
貼附性細胞之繼代培養. Page 7. 7. • 再以5 ml PBS輕輕清洗細胞。 • 將PBS取出至廢液桶。 • 重複上述步驟,以PBS再清洗. 一次。 輔仁大學生命科學系. 貼附性細胞之繼代培養.
方法一:37℃或室溫作用數分鐘,於倒立顯微鏡下觀察,當細胞將要分離而呈現圓粒狀時, 吸掉trypsin-EDTA溶液,輕敲培養瓶邊緣使細胞自瓶壁脫落,然後加入適量之新鮮培養基, ...
... 細胞和培養基均勻混合後,放入培養箱中培養。 繼代培養(cell subculture):當細胞生長至一定程度後,收集細胞,分殖於新的培養基中。 進行繼代培養時,其依細胞種類 ...
開始培養細胞,需要練習細胞一般的繼代、細胞計數和觀察細胞生長情形。 ... 實際操作和一般培養步驟相同,取適量細胞離心(300 g 3-5分鐘) 去掉上清後,以 ...
細胞 培養之基本概念: 1、 培養細胞相關資訊之蒐集及閱讀. 2、 選用適當之培養基. 3、 無菌操作步驟. 4、 解凍細胞及細胞之繼代培養. 5、 冷凍細胞及細胞之 ...
#7. 繼代培養 - 農業知識入口網
從移植材料中所培養的為首代,利用此細胞再去做繼續培養稱之為繼代培養。 如培養植物細胞,首先我們會先取植物體(如莖、根等等)並滅菌。作為首次的培養。利用此組織細胞 ...
#8. 生物細胞培養標準作業程序
目的:將培養於培養箱中的細胞進行繼代培養,或是因應實驗需求進行分盤。 操作程序:. 實行注意事項H 中操作前的準備步驟。 將Flask 自培養箱中取出,於 ...
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#10. 細胞培養- 維基百科,自由的百科全書
培養步驟 編輯 · 取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎並加入胰蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。 · 製備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將 ...
#11. 留下1/5並加入新鮮的培養基作繼代培養
目前研究最多的是SF細胞株,能懸浮培養或貼盤培養於25-28℃,細胞倍增時間為18-24小時。 實驗材料. SF-9 昆蟲細胞. TNM-FH 添加10% FBS. T-flask. Trypan blue. 步驟. 將 ...
#12. TW201639952A - 細胞培養方法以及細胞培養裝置
因此,於將細胞以某種程度之規模培養時,通常係一面重複繼代一面進行培養,以使細胞密度維持於適性。 ... 細胞密度為止繼續細胞之培養之擴大培養步驟。 根據本實施方式,在 ...
#13. 細胞培養
室溫即可操作,只需簡單混合步驟。 □ 可做為注射水凝膠,適用於體內研究 ... 提供單細胞繼代培養,無需加任何凋亡抑制劑( 如:ROCKi 等),種下低密度細胞即可 ...
#14. 哺乳動物細胞培養
了解Thermo Fisher的哺乳動物細胞培養產品,助您獲得可靠的研究成果;且從我們的動物細胞培養方案中,了解繼代培養、解凍和冷凍細胞的原則和常見步驟。
#15. 細胞長多少才是8 分滿呢?
要達成實驗的一致性,實驗的每個步驟都要標準化。那細胞培養繼代的時候呢? 繼代細胞時,通常都是靠細胞的”覆蓋率”來評估是否需要繼代。以8成滿要繼代為例子,下面哪個 ...
#16. TWI643953B - 以自體血漿培養原始細胞的方法
... 步驟所製得:將自體血液離心兩次;以及以過濾器過濾後,即可獲取用於細胞培養的自體血漿。其中該添加物更包含0.5ng/mL至10ng/mL重組人類鹼性成纖維細胞 ... 在細胞繼代培養時 ...
#17. 細胞冷凍保存BCRC小教室- 細胞繼代
此方法是目前最直接與靈敏之步驟,亦是用來評估其他偵測新步驟之標準步驟之。 缺點為培養時間長,須3~5星期才能判斷。 且有些黴漿菌不易在目前之培養基中培養出來例如M.
#18. RD 細胞適應培養(Adaptation)建立各型腸病毒標準病毒株庫
將已呈現細胞病變之標準株再依步驟2~10 培養繼代增量. 11. 若經4-5 代仍無CPE 時,則改為RD 細胞酵素處重新病毒重新繼代. 13. Page 14. 或初生乳RD 細胞交互繼代感染. 12.
#19. 以無血清微載體細胞培養量產新型流行性感冒疫苗
在MDCK 及Vero 細胞進行繼代培養,然後以蝕斑純化(plaque purification)選殖出高 ... 步驟為,取50µl. 的細胞溶液和50µl 的trypin blue 染劑混合,已經死亡的細胞會被 ...
#20. 繼代細胞 - 實驗室廢宅腐女- 痞客邦
前準備:medium、PBS、trypsin這三罐從冰箱拿到37度水浴槽回溫,從培養箱(incubator)中拿出細胞在顯微鏡底下觀察,紀錄滿度。 環境整理.
#21. 生物繼代培養(subculture) | 自然科學板
以下的單位都是10cm的dish(培養皿)的scale ⑴把舊的Medium抽出來(注意為什麼是Medium可以參考最後一個步驟)這個步驟的話可以用pipette ⑵加入約5cc的PBS, ...
#22. 贴壁细胞的继代培养. - CellCulture
... 细胞, 它们必须脱离增长支持以使它们处于暂停状态. 当您分裂细胞培养物时,有必要使用精准有序, 遵循定义明确的协议, 不断重复以在以下继代培养步骤之 ...
#23. 奈米材料添加對纖維母細胞成長之影響
2實驗步驟……………………………………………………..30. 3.6 奈米銀製備 ... 1916 年Rous 及Jones. 利用蛋白酶(Trypsin)由組織中分解出細胞,之後發展出附著性細胞的繼. 代培養法。
#24. 機械工程學系碩士論文 - 國立交通大學
本實驗肌肉母細胞(Myoblasts)採用直徑6 公分培養皿繼代,首. 先將培養皿之廢液清除,吸取2ml 磷酸鹽溶液(PBS)以順時針方向繞. 著培養皿內側清洗,此步驟需做兩次,吸取0.5 ...
#25. 自動化細胞繼代培養系統
細胞 培養為生物實驗研究之根本,時至今日,多數細胞培養實驗仍需仰賴大量人力且耗費大量時間,反覆操作類似步驟以進行培養流程。市面現存自動化細胞培養機台所費不貲, ...
#26. ICH Q5D:生物技術/生物製劑所需細胞受
3、細胞受質的生產. Page 7. 7. 選擇合適的親代細胞株是細胞受質生產的一關鍵步驟。 ... 使用連續繼代細胞培養方式去生產生物技術/生物製劑的最大優勢之一即為每一. 批次的 ...
#27. 傳代培養
傳代培養傳代方法,培養材料,培養步驟,主要區別,培養實驗,實驗原理,材料和器材,實驗步驟,細胞傳代培養,培養細胞,
#28. 黴漿菌污染會對細胞培養有何影響?
Q8: 附著性細胞繼代時所使用之trypsin-EDTA 濃度?購買後應如何處理? A: 一般使用 ... *註: -20°C 不可超過1 小時,以防止冰晶過大而造成細胞大量死亡,亦可跳過此. 步驟 ...
#29. 本人
細胞繼代 超過20代即重新自液態氮中重覆上述步驟解凍細胞株。 C. PK-15細胞株培養 ... 細胞繼代與培養請參照(一)病毒抗原檢驗,1. 病毒分. 離,(2)細胞製備。 B. 將消化之 ...
#30. 什麼是『繼代培養』(生物學名詞)?
什麼是『繼代培養』(生物學名詞)? 參考資訊; 種細胞步驟 · 細胞繼代定義. 文章 參考資訊. 繼代培...繼代培養: 從移植材料中所培養的為首代,利用此細胞再去做繼續培養稱 ...
#31. 細胞繼代- 大三進實驗室
培養流感病毒常用的宿主細胞有很多種,而我所使用的宿主細胞是mdck犬腎上皮細胞,它是種貼壁細胞。 步驟:. 冷凍前應注意細胞生長情形,可在日前更換半量或全量培養基。.
#32. 試驗方法- 動物細胞的冷凍保存
正確的冷凍保存步驟和方式要比投資於設備及試劑重要多了, 例如建立安全庫存(safety stock), 保存繼代數低的細胞,防止細胞特性的改變,及提供和使用 ...
#33. 如何建立研究用的細胞模型
根據不同時間點收集細胞樣本後以Caspase 3或是Caspase 8抗體檢測其蛋白變化。 紫外線刺激HeLa細胞: 將HeLa細胞繼代後,待細胞密度達到80%時,打開培養皿上蓋後 ...
#34. 贴壁细胞系的传代培养
此时,细胞系应进行继代或传代培养,以防止培养物死亡。为了传代培养细胞,需要将 ... 如果细胞粘附牢固,则重复该洗涤步骤。 用移液器将胰蛋白酶/EDTA按照约1 mL/25 cm ...
#35. 應用聚酯纖維載體培養融合瘤細胞株 - 農業部獸醫研究所
取新鮮繼代48 小時內融合瘤細胞以培養基調. 整細胞濃度為1x105 cells.mL-1後,依 ... 然後,. 重覆前述步驟一次,使細胞完全溶解釋出細胞核。全. 程約1 小時後,取樣以血球 ...
#36. 傳代培養
culture)。如何讓接種的細胞儘快貼壁,是決定培養成功的關鍵步驟: 1、取決於適當的生長基質表面; 2 ...
#37. ReproCELL 彙整- 世翔國際有限公司
添加到細胞培養基中顯著提高了從單細胞成功再陪值(sub-cloning) 的可能性,在解凍過程中添加時,可提高恢復和解凍效率,也增加了繼代後細胞的附著。 ... 步驟。然而,製造胚 ...
#38. 人類細胞治療產品查驗登記審查基準 - 台灣藥物法規資訊網
當細胞治療產品在體外繼代培養時,可能導致基因的不穩定. 性,而產生致瘤性。幹細胞治療產品進行細胞擴增或分化. 時,其分化的效率無法達到百分之百,或純化步驟無法有效.
#39. 讓細胞- 健康的秘訣
細胞 毒性是指由產品、材料或細胞培養液所造. 成的細胞死亡、細胞溶解和抑制細胞生長等反應。 ... 除此之外,細胞培養最常做的便是繼代,不當. 使用胰蛋白酵素trypsin 會導致 ...
#40. 建立泡桐屬懸浮細胞培養的快速方法
日本泡桐與台灣泡桐在定期繼代培養下可維持一年以上,但泡桐與白桐在不斷繼代培養後細胞逐漸喪失活力而失敗。 ... 細胞培養的材料的步驟完全不需要. 最後更新日期:105-10 ...
#41. 2 細胞繼代培養- 細胞培養步驟
简述细胞培养般步骤. 、 复苏. 1. 把冻存管从液2 細胞繼代培養原代細胞培養方法來自專欄原代細胞培養基. 原代細胞培養也叫初代培養,是建立細胞系的第步,其步驟包括 ...
#42. Cell line 細胞株
(CAI) 的原代細胞,和即用型幹細胞,包括誘導多能幹細胞(iPSC)、神經、間質和造血 ... ☑ 提供詳細的步驟,包含解凍細胞、繼代及凍細胞等 ☑abm專有的細胞特異性PriGrow ...
#43. Page 19 - 2015 April 3D 細胞培養新趨勢
細胞 接種的步驟如同2D細胞培養一樣的簡單方便。 3. 該如何將細胞種到3D ... 細胞種在3D cellusponge 上; 細胞該如何繼代培養呢? 細胞球體可以使用胰蛋白酶 ...
#44. 細胞治療產品應用專刊
可重複翻轉. 步驟,將培養液中的細胞或營養物質均勻混合。 4. 將CellStack 小心地放 ... 繼代支持large aggregates、small aggregates 及single cell passaging. 低濃度的 ...
#45. 如何培养细胞?这套细胞培养新手入门指南送给你
第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于–20 °C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。 9. 悬浮细胞应如何继代处理?
#46. The CliniMACS Prodigy® Adherent Cell Culture System
在這裡,我們展示了使用CliniMACS Prodigy 貼壁細胞培養系統,可以靈活地組合處理模塊,從而可以擴增來自不同組織來源的MSC,並從原代組織或單細胞懸液中繼代。
#47. 迷迭香微體繁殖與細胞懸浮培養之研究
浸潤至組織內部,因此在第4 次繼代培養時,大部分細胞均呈褐化、死亡;. 經0.5 ... 2001. 利用單一培養步驟誘導胡瓜體胚形成之研究. 高. 雄區農業改良場研究彙報12(2):15 ...
#48. 動物組織培養疫苗量產技術之研習
熱病毒,用以生產疫苗相當具有經濟價值,另值得學習的地方,使用於細胞培養. 的細胞繼代培養液中只添加2﹪的成年牛血清,而在接種病毒後更換維持培養. 液,維持培養液配方 ...
#49. (12)发明专利申请
2.根据权利要求1所述的微量抽测植物悬浮培养细胞液浓度的方法,其特征在于,步骤. 1)中,配制悬浮继代细胞的系列标准浓度细胞液;染色,拍摄获得图片;具体过程如下: (1)收集13-1 ...
#50. 豬瘟檢驗方法修正規定
用之細胞以及細胞培養所需之血清應確認無任何瘟疫病毒 ... 細胞繼. 代超過20代即重新自液態氮中重覆上述步驟解凍細. 胞株。 C. PK-15 細胞株培養角瓶繼代及使用前應以目視及 ...
#51. 研究材料來源二、淋巴細胞株的培養
每隔2-3 天加5 或10ml 培養液至flask中,待. 培養液到一定體積後,離心1000 rpm 5 分鐘,去上清液後換至新flask. 中,繼代培養。 ... 步驟如下:加入70 μl solution I (50 mM ...
#52. 細胞繼代- 細胞培養常見問題及解答華人留學生活sa123 ... - 8Tx56
細胞 培養常見問題及解答. 1.如何選用特殊細胞系培養基?. 培養某型別細胞沒有固定的培養條件。. 在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易 ...
#53. 法源法律網-相關法條
細胞 共同培養分析法應該包括一個敏感細胞株(例如Mus dunni 細胞株以測試兩棲性的MLV) 進行至少5 個繼代培養,以便增殖任何可能的RCR 病毒。增殖後的 ...
#54. 血清替代物及無血清培養液對斜紋夜蛾細胞培養之影響【研究 ...
細胞 培養盒置於28℃之定溫培養箱,每. 隔三天進行一次繼代培養。 二、細胞之適應及生長曲線測試. 試驗前細胞例行培養於TNM-FH昆蟲細.
#55. 高通量單細胞篩選與細胞單株化培養之雙微孔微流晶片
細胞 的繼代. 培養則是當細胞生長至70%-80% 滿時,使用重. 組酵素(Accumax. TM ... 在經細胞捕抓與沖洗的步驟後,依然可留在細胞. 篩選微孔中(不同的細胞株具不同的篩選效率) ...
#56. 臺北醫學大學醫學院醫學科學研究所碩士論文
繼代 的培養我. 們會將培養液吸乾,並利用phosphate-buffered saline 清洗三次後 ... 步驟將細胞. 收取下來,再做western blotting 實驗,最後再以caspase-3 的專一. 性抗體 ...
#57. 一种改进的烟草悬浮细胞继代方法
如此回复2~3 次,可吸. 到5 mL 的细胞悬浮液,然后转移到新鲜培养基. 中。反复进行以上步骤。操作时要迅速,提起. 移液器时不可脱离液面,即吸头口一直 ...
#58. 細胞培養
day 0. 問題與討論:. cell L929 繼代前(顯微鏡400倍放大). 細胞第二 ...
#59. 高靈敏度qPCR檢測-黴漿菌(Mycoplasma) - 產品資訊
˙ 對真核細胞無毒性。 ˙ 使用 ... * 細胞培養盤需"每天" 更換 上述第一步驟之含Myco-Out 去除試劑的medium (如同感冒時每天都要吃藥一樣) * 細胞七分滿時, 就要進行細胞繼代 ...
#60. 2. 血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
附着性细胞继代时所使用之A trypsin-EDTA 浓度?应如何处理? 一般使用之trypsin ... *-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入 ...
#61. 中華民國第56 屆中小學科學展覽會作品說明書
表1 ( 實驗流程). 細胞繼代→細胞處理→拍照→分析細胞→數據處理. Page 5. 4. 二 ... ( 若無此步驟,也無法開啟Sholl Analysis,如圖15 ). 4.設立門檻(threshold),擷取一個 ...
#62. 傳代培養_百度百科
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。
#63. 超節省繼代細胞法- 看板Biotech - 批踢踢實業坊
繼代細胞 時,一開始也是直接把medium倒掉後,用dropper1吸約2.5~3mL PBS 輕 ... 這一步是關鍵步驟,每個細胞作用時間不一樣,開始時要test作用時間,要 ...
#64. 细胞培养中的细节问题
3.3. 依细胞继代培养之操作,收集培养之细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数 ... 1.3. 存活测试之步骤为dye exclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因 ...
#65. 免疫細胞治療產品應用專刊進階生物科技- 細胞培養步驟
本計畫研究目的在建立微載體與生物反應器之細胞高密度懸浮培養技術,以由UK NIBSC 得到的疫苗種株NIBRG 14 在胚胎蛋及MDCK 細胞培養的效步驟為,取50µ 2 細胞繼代培養正確 ...
#66. 細胞培養MIT!工研院打造自動系統Yahoo奇摩新聞- 細胞繼代
細胞之繼代培養細胞繼代培養原理細胞Subculture目的以及原理藥師+. 細胞培養英語: cell culture 是種现代生物学技術,是將真核生物或原核生物細胞培養在步驟:. 冷凍 ...
#67. 細胞繼代- 葡萄细胞悬浮培养体系的建立和优化
十九世紀末,植物學家注意到植物組織細胞在扦插無性繁殖時,具有分化. 芽或根的能力,並開始對這方面培植體誘導癒合組織形成,並可繼代培養維持未分化薄壁細胞群。 步驟:.
#68. 細胞製劑產品發展趨勢與審查法規考量經驗分享- 細胞繼代
接种后观察并记录愈伤组织的状态。诱导成功的葡萄愈伤组织可在诱导培养基上每月继代次,继代3次以上,达到稳定状态,用在進行細胞行為以及基因表現的相關研究時, ...
#69. Hs68 與HaCaT 懸浮共培養的形態分析
1 細胞培養(cell culture)和繼代(passage). 本實驗的細胞來自購買得到的cell line 細胞。 (1) 纖維母細胞: a. 培養:我們使用的培養液為DMEM 加上10%的FBS 與1%的 ...
#70. 細胞培養步驟- 實驗室品管的重要性長庚婦產科
了解Thermo Fisher的哺乳動物細胞培養產品,助您獲得可靠的研究成果;且從我們的動物細胞培養方案中,了解繼代培養、解凍和冷凍細胞的原則和常見步驟。 本發明解決上述 ...
#71. 輔仁大學岥命科學系細胞學實驗請尊重智慧財產權禁尩複製或拷貝
2 細胞繼代培養通过细胞培养可以直接观察活细胞的形态结构和生命活动,联合各种技术进行各种物理、化学生物的研究。 简述细胞培养般步骤. 、 复苏. 1. 把冻存管从液原代 ...
#72. 豬肉片買回家,別整盤直接放冰箱!專家教4步驟正確保存 ...
基本上包了保鮮膜及放入保鮮袋後即可放進冰箱冷凍,但需留意冷凍時間愈長,食材上的冰塊結晶愈多,這樣會破壞食材的細胞。 ... 繼上一波與古娃娃聯名的 ...
#73. 【下班經濟學】不想罹癌?這件事千萬別做!名醫教你簡單6招 ...
... 細胞處方箋,養生可以這樣做。 扶正的力量治百病?名醫曝3警訊小心癌症 ... 步驟、10分鐘完工,吃了都流淚 · 想賞楓不必大老遠跑日本!全台10處最美楓紅 ...
#74. 硬核| 細胞培養筆記- 生醫觀點BioMed
所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。 另外關於傳代很重要一點 ...
#75. 第二章:人類胚幹細胞培養的新方法
... 細胞得來的而非小鼠細胞。另外,Richards. 等人曾比較各種細胞餵養hESCs 的結果,發現胎兒的皮膚細胞和成年的輸卵管上. 皮細胞皆能支持分化的人類胚幹細胞達20 個繼代。
#76. 权威发布|中国肝硬化临床诊治共识意见
2)动力因素:主要由活化HSC和血管平滑肌细胞等肝窦细胞和窦外细胞收缩所致。 ... AD是代偿期或稳定失代偿期肝硬化发生以下急性事件时的表现,包括1个月内 ...
#77. 30個不可不知的細胞免疫處方箋:全面了解細胞、免疫、病毒相關知識,當個聰明的病人
... 細胞培養過程中進行更換培養基、繼代等工作時,需在無菌工作台上進行。四、常見細胞培養的步驟舉例說明(一)細胞分離和初代培養從供體取得組織並分離得到所需細胞後,接種 ...
#78. 普通遗传学实验指导 - 第 96 頁 - Google 圖書結果
... 继代培养。在继代培养时,应将较大的细胞团块和接种物残渣除去。若从植物器官或组织开始建立细胞悬浮培养体系,就包括愈伤组织的诱导、继代培养、单细胞分离和悬浮培养 ...
#79. 生物製藥技術 - 第 194 頁 - Google 圖書結果
... 細胞懸浮物於 4 °C下可在國際間轉移。通常單層培養細胞加滿生長液後可原封不動地於常溫下密封包扎轉移,至目的地後需進行移植繼代培養。最好將待轉移的細胞於液氮中保存 ...
#80. 圖解遺傳學 - 第 94 頁 - Google 圖書結果
... 細胞懸浮液。轉入特殊培養液中進於二氧化碳培養箱中保溫培養行原始代培養將原始代細胞分裝到多個扁形瓶中進行繼 ... 步驟包括,先對動物體的胚胎、肌肉、腎臟等組織經過酶 ...
#81. 智慧醫療AIoT應用與商機 - 第 137 頁 - Google 圖書結果
... 細胞增殖技術與 AI 跨域整合,將可發展出的智慧自動化製造,兩者結合可望創造不同 ... 步驟中,建構一條細胞價值鏈。為了提升細胞價值鏈中每個過程產出的效益,日本業者透過 ...
#82. 您不可不知道的幹細胞科技 - 第 164 頁 - Google 圖書結果
... 細胞,由於使用的是細長的微量麥管,進行冷凍保存時可直接將微量麥管由常溫浸入液態 ... 步驟,由於細胞液體積很小,一旦塑膠麥管離開液態氮後,在室溫下很快就溶解,所以必須 ...
#83. 最新生物化學工程學 - 第 666 頁 - Google 圖書結果
... 細胞培養法 D :露出生長點( 1 )細胞培養技術將植物細胞大量培養,以生產生物鹼和 ... 繼代培養 1 培養基 Murashige and Skoog's 洋菜培養基( 2,4 - D 0.5mg / L ...
#84. 107年食品科學概論[經濟部發證+教育部認可_初級食品品保工程師]
... 細胞組成 acid profile)、生態學上(Ecological)微生物的來源化學分類(ChemoTaxonomic) (二)微生物菌株初步篩選 1.分離出純種菌株(culture):將 ... 繼代. 16 第一章食品 ...
#85. 肺炎人體疫苗來了!全球第一mRNA藥物研發公司研製,已開啓 ...
另一方面則在於Moderna的技術:messenger RNA——不需要病毒或其蛋白質的實際樣本,就能生產具有遺傳密碼的核酸(藥物/疫苗),指示人體自身的細胞從病毒中 ...
#86. CC1-K6SL7B181KSEW - Datasheet - 电子工程世界
目前随着下游品牌厂商集中度、代工环节集中度、整个市场集中度越来越高、上游零部件企业之间也在走向集中。印证这一“集中化”趋势的还有几大案列。 继摄像头模组厂商 ...
#87. 判断肾脏是否健康的7个问题
由于肾脏具有很大的代偿能力,如果硬化坏死肾小球的比例很小,只要进行积极的治疗来挽救肾脏患病的固有细胞,某些肾功能仍然可以得到保证,激素加免疫 ...
#88. 《欧美中日韩免费观看网站欧尼》资源列表-古巴剧 - 石油化工
细胞 计数仪电穿孔/电转仪细胞转瓶培养箱单细胞分析仪流式细胞仪染色体分析仪细胞 ... 色谱试剂氘代试剂纳米材料电镜耗材分子材料光学材料微电子材料 · 标准品 · 农药化肥 ...
細胞繼代 步驟 在 超節省繼代細胞法- 看板Biotech - 批踢踢實業坊 的必吃
剛開始學養細胞時 進階舉辦了一場有關細胞培養的演講
講師是食研所的負責人
他說 食研所負責這麼多種的細胞培養
他們繼代時從不離心 因為離心傷細胞
那這樣子要怎麼passage呢?
我發展了一套超節省超環保的繼代細胞法
過程中只需要用2支無菌dropper 完全不需用到塑膠pipette
但前提是 須將細胞養在10cm dish中 以我的MRC-5 cell為例
1. 一開始解凍細胞時須以37℃快速解凍後,就直接將細胞加入10cm dish中,
medium約10mL,不需離心,隔天等細胞貼上後換medium就好
換medium時直接把上蓋打開把medium倒到廢液桶就好,再用dropper吸約7mL
medium到dish中。
大部分的細胞 (像我的MRC-5) 是不太會受低濃度的DMSO影響的,只有少部分細胞
很敏感才需要以離心把DMSO去掉,例如 MDCK cell。而直接把上蓋打開把medium
倒到這種豪氣的作法是要勇氣的,要一氣呵成 (其實就跟配meduim一樣,大家不
都是把DMEM跟MEM直接倒出來到flask中) 本人從沒有污染過,同事看我這樣也很
傻眼沒人跟進,但是這樣就直接省下了1支塑膠pipette,吸medium時我都是用
dropper,只是要吸很多次而已,除非是在分細胞到很多well中才會用到比較方便
的pipette。成本來說無菌dropper約3元/支,5mL pipette約4.2元/支,
10mL pipette約4.5元/支。
2. 繼代細胞時,一開始也是直接把medium倒掉後,用dropper1吸約2.5~3mL PBS
輕輕滴到細胞上 (此時把dropper1要留著倒放在架子上,不要碰到別的東西就好,
通常我們都用50mL離心管所附的保麗龍),以PBS wash細胞後直接倒掉,再用
dropper1吸1mL T/E到dish (因為T/E本來就是溶在PBS中,所以不衝突) ,
dropper1一樣要留著,接下來就是放到37℃作用。這一步是關鍵步驟,每個細胞
作用時間不一樣,開始時要test作用時間,要找到細胞要掉不掉的時間,像我
MRC-5作用4min會全掉下來,但作用2.5min時不拍它,它還是暫時不會飄起來,
為什麼要這樣子?因為作用到2.5min時就用dropper1把T/E吸掉 (dropper1要
繼續留著),此時細胞還在disk上。用dropper2吸約2mL medium到dish中
(dropper2要留著),再用dropper1 pipetting細胞看要分幾分幾,再用dropper2
補足medium。
整個過程只需用到2支dropper,省下了離心管和無數支pipette,我相信大部分的人
每一個步驟都用掉一支pipette,整個過程下來4~5支pipette外加一支離心管跑不掉,
因為很過程麻煩,大家又怕污染,所以不好推動,給大家參考囉!
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